快速液相色譜柱的分離原理基于樣品中各組分在固定相與流動相之間分配行為的差異。當(dāng)流動相攜帶樣品通過色譜柱時，不同組分因極性、分子大小、電荷等性質(zhì)的差異，與固定相的吸附、分配、離子交換等作用力不同，導(dǎo)致它們在色譜柱中的遷移速度產(chǎn)生差異。分配系數(shù)較大的組分在固定相中停留時間較長，流出較慢；反之，分配系數(shù)較小的組分流出較快。這種差異使得各組分按順序流出色譜柱，從而實現(xiàn)分離。
 

　　快速液相色譜柱可根據(jù)填料基質(zhì)、分離模式及用途進(jìn)行分類，常見類型包括：
 

　　反相色譜柱：
 

　　填料：以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)(如C18、C8等)。
 

　　特點：流動相極性較強(qiáng)(如水、緩沖液與甲醇、乙腈的混合物)，樣品流出順序與極性相反，極性強(qiáng)的組分先流出，極性弱的組分后流出。
 

　　應(yīng)用：廣泛應(yīng)用于藥物分析、環(huán)境監(jiān)測、食品檢測等領(lǐng)域。
 

　　正相色譜柱：
 

　　填料：硅膠或其他具有極性官能團(tuán)的鍵合相填料(如胺基團(tuán)、氰基團(tuán)等)。
 

　　特點：流動相極性相對比固定相低(如正己烷、氯仿等)，樣品流出順序與極性相同，極性強(qiáng)的組分后流出，極性弱的組分先流出。
 

　　應(yīng)用：適用于分離極性差異較大的化合物。
 

　　離子交換色譜柱：
 

　　填料：磺化交聯(lián)強(qiáng)陰/陽離子鍵合硅膠。
 

　　特點：根據(jù)樣品中離子的電荷性質(zhì)進(jìn)行分離，強(qiáng)陰離子交換色譜柱(SAX)用于分離陰離子，強(qiáng)陽離子交換色譜柱(SCX)用于分離陽離子。
 

　　應(yīng)用：在生物化學(xué)、藥物分析等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
 

　　聚合物基質(zhì)色譜柱：
 

　　填料：聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等。
 

　　特點：可在pH值為1~14的范圍內(nèi)使用，對蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的分離非常有效。但柱效相對較低，且流動相變化時可能出現(xiàn)膨脹或收縮。
 

　　應(yīng)用：主要用于分離大分子物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、多肽等。